Quality of bevacizumab (Avastin®) repacked in single-use glass vials for intravitreal administration / Avaliação da qualidade do bevacizumabe (Avastin®) fracionado em frascos de vidro de dose única para administração intravítrea

ABSTRACT Purpose: Avastin® (bevacizumab) is an anti-vascular endothelial growth factor (VEGF) monoclonal antibody given as an off-label drug by intravitreal administration for treatment of ocular diseases. The drug's clinical application and its cost-benefit profile has generated demand for its division into single-use vials to meet the low volume and low-cost doses necessary for intraocular administration. However, the safety of compounding the drug in single-use vials is still under discussion. In this study, the stability and efficacy of Avastin® repacked in individual single-use glass vials and glass ampoules by external compounding pharmacies were evaluated. Methods: Polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE), size-exclusion chromatography (SEC), dynamic light scattering (DLS), and turbidimetry were selected to detect the formation of aggregates of various sizes. Changes in bevacizumab biological efficacy were investigated by using an enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Results: Repacked and reference bevacizumab showed similar results when analyzed by PAGE. By SEC, a slight increase in high molecular weight aggregates and a reduction in bevacizumab monomers were observed in the products of the three compounding pharmacies relative to those in the reference bevacizumab. A comparison of repacked and reference SEC chromatograms showed that the mean monomer loss was ≤1% for all compounding pharmacies. Protein aggregates in the nanometer- and micrometer-size ranges were not detected by DLS and turbidimetry. In the efficacy assay, the biological function of repacked bevacizumab was preserved, with <3% loss of VEGF binding capacity relative to that of the reference. Conclusion: The results showed that bevacizumab remained stable after compounding in ampoules and single-use glass vials; no significant aggregation, fragmentation, or loss of biological activity was observed.

RESUMO Objetivos: Avastin® (bevacizumabe) é um anticorpo monoclonal inibidor do fator de crescimento endotelial de vasos (VEGF) utilizado "off-label" por meio de administração intravítrea para o tratamento de doenças oculares. A sua aplicação clínica associada ao custo-benefício do medicamento gerou uma demanda para seu fracionamento em frascos de dose única para utilização pela via intraocular. No entanto, a segurança do fracionamento do anticorpo em frascos de dose única ainda é alvo de discussão. Neste trabalho, a estabilidade e a eficácia do Avastin® fracionado em frascos ou ampolas de vidro de dose unitária por farmácias de manipulação do mercado foram avaliadas. Métodos: As técnicas de eletroforese em gel de poliacrilamida (PAGE), cromatografia por exclusão de tamanho (SEC), espalhamento dinâmico da luz (DLS) e turbidimetria foram empregadas para avaliar a formação de agregados de diferentes tamanhos. Alterações na atividade biológica do bevacizumabe foram estudadas utilizando ELISA. Resultados: Amostras referência e do bevacizumabe fracionado apresentaram resultados semelhantes quando analisado por gel de poliacrilamida. Por cromatografia por exclusão de tamanho, um pequeno aumento na quantidade de agregados de alta massa molar seguido de uma redução nos monômeros do bevacizumabe foram observados para as amostras das três farmácias de manipulação quando comparado ao referência. A comparação dos cromatogramas mostrou uma quantidade de redução do monômero inferior a 1% para todas as amostras fracionadas. Por espalhamento dinâmico da luz e turbidimetria, não foram detectados agregados de proteína na faixa de tamanho de micrômetro e nanômetro. No ensaio de eficácia, o bevacizumabe fracionado preservou sua função biológica pois apresentou menos de 3% de perda na capacidade de ligação ao VEGF quando comparado ao referência. Conclusão: Este estudo sugere que o bevacizumabe se mantem estável após fracionamento em ampolas e frascos de vidro de dose unitária pois não foram observadas agregação e/ou fragmentação de proteínas e perda de atividade biológica em quan tidades significativas.

Ocorrência de nitratos e nitritos em queijos minas frescal, mussarela, parmesão e prato / Ocurrence of nitrate and nitrite in cheeses minas frescal, mozzarella, parmesan and prato

Neste trabalho foram avaliados os teores de nitratos e nitritos em queijos expostos à venda no Estado de Minas Gerais em 2009. As análises qualitativas e quantitativas foram realizadas em 77 amostras de queijos: Minas Frescal, Mussarela, Parmesão e Prato, coletadas pela Vigilância Sanitária por meio de PROMAC –Programa de Monitoramento de Aditivos e Contaminantes. Do total de amostras de queijo Minas Frescal, 7 apresentaram não conformidade com a legislação brasileira, em função da presença de nitrato. Os teores de nitrato estavam acima do limite estabelecido pela legislação em 18 das amostras de queijo Parmesão. No queijo Prato foram encontradas 10 das amostras com teor de nitrato acima do limite máximo permitido. Todas as amostras de queijo Mussarela avaliadas estavam em conformidade com a legislação. Em todas as amostras de queijo analisadas neste estudo não houve ocorrência de nitrito.

Avaliação da concentração de minerais e dos fatores antinutricionais fitato e oxalato em multimisturas da Região Metropolitana de Belo Horizonte/MG / Evaluation of mineral concentration and anti-nutritional factors phytate and oxalate in Multimix from the Metropolitan Region of the City of Belo Horizonte/MG

In this work, samples of Multimix, both for industrial use and prepared by the Child's Pastoral in different parts of the metropolitan region of Belo Horizonte / MG were analyzed for determining the concentration of phytates, oxalates and even the minerals K, Mg, Mn, Na, Zn, Fe and Ca. The results showed, in most cases, the concentration of minerals below the recommended daily intake for portions of multi-mixture used, 5 and 22.5g. The concentration of anti-nutritional factors was assessed by the molar ratios of phytate / Fe, phytate / Zn, phytate / Ca, phytate x Ca / Znand Ca / oxalate. The obtained values, in almost all cases > 1, associatedwith low concentration of minerals in the environment, suggest a low bioavailability of essential minerals, which reinforces the debate on the effectiveness of Multimix as a nutritional supplement.

En este trabajo, muestras de "multimistura" del tipo industrial y preparadas por la Pastoral del Niño en diferentes puntos de la región metropolitana de Belo Horizonte, Minas Gerais, Brasil, fueron analizadas para determinar la concentración de fitatos, oxalatos y los minerales K, Mg, Mn, Na, Zn, Fe y Ca. Los resultados mostraron, en la mayoría de los casos, una concentración de minerales abajo de la ingesta diaria recomendada, para las porciones diariasde "multimistura" ingerida: 5 y 22,5g. La concentración de factores antinutricionalesse evaluó mediante las relaciones molares defitato/Fe, fitato/Zn, fitato/Ca, fitato x Ca/Zn y Ca/oxalato. Los valores obtenidos, en casi todos los casos son mayores que la unidad (> 1), esto, asociado a una baja concentración de mineralesen el medio, permite suponer que hay baja biodisponibilidad de minerales esenciales, lo que refuerza el debate sobre la eficacia de la "multimistura" como suplemento nutricional.

Neste trabalho, amostras de multimistura do tipo industrial, preparadas pela Pastoral da Criança em diferentes pontos da região metropolitana de Belo Horizonte/MG, foram analisadas para determinação da concentração dos fatores antinutricionais fitato e oxalato e ainda dos minerais K, Mg, Mn, Na, Zn, Fe e Ca. Os resultados mostraram, na maior parte dos casos, concentração dos minerais abaixo do recomendado para ingestão diária nas porções utilizadas da multimistura, 5 e 22,5g. A concentração dos fatores antinutricionais foi avaliada através das razões molares fitato / Fe, fitato / Zn, fitato / Ca, fitato x Ca / Zn e Ca / oxalato. Os valores obtidos, em quase todos os casos > 1, associados à baixa concentração dos minerais no meio, sugerem uma baixa biodisponibilidade dos minerais essenciais, o que reforça o debate sobre a eficácia da multimistura como complemento nutricional.

Avaliação de resíduos de agrotóxicos em polpas de morango industrializadas / Evaluation of pesticides residues in industrialized strawberry pulps

Amostras de polpas de morango industrializadas, comercializadas no estado de Minas Gerais, foram coletadas no período de 2006 a 2007 pelas Vigilâncias Sanitárias e encaminhadas à Fundação Ezequiel Dias para análise de resíduos de agrotóxicos. Realizou-se a extração pelo método de multiresíduos com acetona, diclorometano e hexano. Os extratos obtidos foram submetidos à análise por cromatografia a gás com detectores de captura de elétrons (CG-DCE), fotométrico de chama (CG-DFC) e nitrogênio fósforo (CG-DNF), espectometria de massa (CG-MS) e cromatografia a líquido de alta eficiência (CLAE) com detectores ultravioleta (UV) visível e fluorescência. Os resultados evidenciaram o uso inadequado de agrotóxicos, sendo detectados produtos não autorizados como acetato, captana, clorfenapir, clorpirifós, dimettoato, ometoato, endossulfam, fenarimol, folpete, metamidofós, procloraz e tetradifona e os autorizados azoxistrobina, difenoconazol, fenpropatrina, iprodiona e procimidona. Isso indica que as boas práticas agrícolas não estão sendo ocupadas poro alguns produtores e mostra a necessidade de fiscalização de alimentos processados, o que levaria à oferta de produtos de melhor qualidade.

Determinaçäo de açúcares em mel floral e mel de melato de algumas regiöes de Minas Gerais e de Santa Catarina / Sugar determination in floral honey and honey dew from regions of Minas Gerais and Santa Catarina

O mel de melato difere do mel floral em relaçäo à sua composiçäo em açúcares. Afim de verificar estas diferenças, foram analisadas 14 amostras de mel floral e 11 amostras de mel de melato e determinados os teores de frutose, glicose, sacarose, maltose, melezitose, erlose e rafinose por cromatografia líquida de alta eficiência com dectetor de índice de refraçäo. Foram testadas diferentes fases móveis para separar melezitose de erlose que säo trissacarideos presentes no mel. O mel de melato apresentou teor de glicose menor que o mel floral, o que foi estatisticamente confirmado pelo teste U de Mann-Whitney. A erlose estava presente em todas as amostras. Näo foi detectada meletizose nas amostras de mel floral. (AU)

Honeydew honey differs of floral honey in sugar aspecto In order to check that, eleven honeydew honey and fourteen floral honey were analysed for frutose, glucose, sucrose, melezitose, erlose and rafinose by high performance liquid chromatography with refractive index detector. Differents mobille phases were tested to separate melezitose from erlose, both are trissacharides commonly found in honey. Honeydew honey presented less glucose contente than honey and erlose was presente in ali oneydew honey. Melezítose was not detected in t10- ral honey samples. (AU)